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上海遠慕生物科技有限公司

兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒性能特點
點擊次數:1729 更新時間:2017-10-09

上海遠慕生物科技詳細為您介紹兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒性能特點,用途,標本要求,操作流程,適用范圍,價格,使用說明書等詳情,本司是家科研試劑老牌供應商,專業經營:進口/國產ELISA試劑盒,動物血清血漿,質粒載體,標準品對照品,培養基,抗體,實驗耗材,染色液,化學試劑,生化試劑,蛋白質,抗生素,細胞株,其他科研試劑,提供ELISA試劑盒免費代測服務,品種齊全,訂購!

 

中文名:兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒
別名:兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA Kit
供應商:上海遠慕
規格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6個月
適用范圍:本試劑盒僅供科研使用,不得用于臨床。
ELISA試劑盒種屬:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物ELISA試劑盒等。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。
產品用途:用于測定人血清,血漿,組織及相關液體樣本中的含量或活性。
兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒性能特點:靈敏性高、特異性強、重復性好。

兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒性能特點

兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA檢測試劑盒標本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
3.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書
4.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
5.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
6.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
7.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
8.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
9.溫育:操作同3。
10.洗滌:操作同5。
11.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
12. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
13. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

 

兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理方法:
1、血清-----室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心
2、血漿-----應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心
3、細胞培養上清---檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清
4、組織標本-----切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用
5、培養細胞----- 檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

 

兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒操作步驟:
1、加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl,然后再加待測樣品10µl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
2、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
5、加酶:每孔加入酶標試劑50µl,空白孔除外。
6、顯色:每孔先加入顯色劑A50µl,再加入顯色劑B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
7、終止:每孔加終止液50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
8、測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

 

兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒注意事項:
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本od值大于標準品孔*孔的od值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

 


1.特異性強:不與其它細胞因子反應。
2.重復性好:板內、板間變異系數均小于10%。
3.穩定性高:實驗效果很穩定。
4.超靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品,稀釋度和樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。

 

兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒組成及試劑配制:
1.酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2.標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3.樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6.生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7.辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9.濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10.終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

 

 

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標簽:

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