上海遠慕生物科技是家專業供應進口/國產ELISA試劑盒的優質供應商，專業出售人熱休克蛋白糖蛋白96（HSP gp96）ELISA檢測試劑盒，酶聯免疫試劑盒，白介素試劑盒，金標檢測試劑盒，染色試劑盒，生化試劑盒以及培養基，抗體，動物血清，標準品，化學試劑，實驗耗材，細胞株，其他實驗試劑及實驗品，ELISA種屬涵蓋了科研實驗所需的動植物，咨詢！

    中文名：人熱休克蛋白糖蛋白96（HSP gp96）ELISA試劑盒

    別名：人熱休克蛋白糖蛋白96（HSP gp96）ELISA Kit

    供貨商：上海遠慕

    規格：48t/96t

    檢測范圍：人、綿羊、小鼠、大鼠、豬、兔、山羊

    特異性：本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的，且與其他相關蛋白無交叉反應。

    檢測種屬：人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。

    適用范圍：此試劑盒僅用于科研實驗，禁用于臨床 。

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    ELISA的液體類標本：

    包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

    1）血清：

    室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

    2）血漿：

    應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

    3）尿液：

    用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

    4）細胞培養上清：

    檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。

    檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

    5）組織標本：

    切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。

    技術原理：

    1.抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。

    2.結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。

    3.酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。

    4.受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。

    5.此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。

    6.加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復性好。以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。

    操作步驟：

    1、準備：從冰箱取出試劑盒，室溫復溫平衡30分鐘。

    2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。

    3、加標準品和待測樣本：取足夠數量的酶標包被板，固定于框架上，分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標準品孔中加入標準品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）；空白對照孔不加。

    4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。

    5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板4次（也可用洗板機按說明書操作洗板）。

    6、加酶標工作液：每孔加入酶標工作液50μL，空白對照孔不加。

    7、溫育：重復4的操作。

    8、洗板：重復5的操作。

    9、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL，37℃避光顯色15min。

    10、終止：取出酶標板，每孔加終止液50μL，終止反應（顏色由藍色立轉黃色）。

    11、測定：以空白孔調零，在終止后15分鐘內，用450nm波長測量各孔的吸光值（OD值）。

    12、計算：根據標準品的濃度及對應的OD值，計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據樣本的OD值，在回歸方程上計算出對應的樣品濃度，也可以使用各種應用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數。

    人熱休克蛋白糖蛋白96（HSP gp96）ELISA試劑盒操作注意事項：

    1.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。

    2.試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

    3.使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

    4.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

    5.洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

    6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

    7.加入試劑的順序應*，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

    8.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

    9.底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

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